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GPC凝膠凈化系統(tǒng)的使用要注意哪些操作?
  • 更新時(shí)間:2023-03-13      瀏覽次數(shù):742
    •   GPC凝膠凈化系統(tǒng)是一種高效的蛋白質(zhì)分離、純化工具,主要用于從復(fù)雜樣品中分離和純化目標(biāo)蛋白質(zhì)。其作用是通過(guò)基于凝膠過(guò)濾層析技術(shù)(gel filtration chromatography,GFC)來(lái)實(shí)現(xiàn)樣品蛋白質(zhì)的分離和純化。
        原理:GPC凝膠凈化系統(tǒng)是基于凝膠過(guò)濾層析技術(shù)。這種技術(shù)利用凝膠基質(zhì)對(duì)樣品中的蛋白質(zhì)分子的大小分離作用。分子量大的蛋白質(zhì)分子無(wú)法進(jìn)入凝膠內(nèi)部,而分子量小的蛋白質(zhì)分子可以通過(guò)凝膠的縫隙進(jìn)入內(nèi)部。因此,凝膠內(nèi)部的分子量大的蛋白質(zhì)分子會(huì)被排除在外,而分子量小的目標(biāo)蛋白質(zhì)則可以通過(guò)凝膠內(nèi)部的孔隙被分離和純化。
        GPC凝膠凈化系統(tǒng)由高壓恒流輸液泵、紫外檢測(cè)器檢測(cè)器、自動(dòng)液體處理器組成。高壓恒流輸液泵采用雙柱塞串聯(lián),最大流速可達(dá)50ml/min。可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)范圍為190~600nm,可以準(zhǔn)確監(jiān)測(cè)色譜流出物的狀態(tài)。自動(dòng)液體處理器的進(jìn)樣手臂由電機(jī)帶動(dòng)實(shí)現(xiàn)X-Y-Z三維運(yùn)動(dòng),確定進(jìn)樣及收集位置,液路系統(tǒng)的控制部分由三支電磁閥組成,通過(guò)電路系統(tǒng)控制電磁閥的開關(guān)實(shí)現(xiàn)廢液、餾分、干凈溶劑的任意切換,進(jìn)樣臂的Z軸運(yùn)動(dòng)使自動(dòng)液體處理器具有了隔膜穿刺功能。
        操作方法:首先,需要將GPC凝膠填充到柱子中。然后,將需要分離和純化的樣品加入到柱子中,樣品會(huì)通過(guò)凝膠過(guò)濾層析分離出來(lái),分離出來(lái)的蛋白質(zhì)可以被收集。此外,需要注意的是,樣品中的溶液濃度和pH值可以影響凝膠分離效果,因此需要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。
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